Патент на изобретение № 2735080

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и может быть использовано для таргетной стимуляции продукции оксида азота макрофагами при коррекции нарушений в иммунной системе при патологических состояниях, связанных с недостаточностью Th1-зависимого иммунного ответа (хронические, вялотекущие и рецидивирующие инфекционные, а также онкологические заболевания).

Принципиально новым в предлагаемом изобретении является применение в качестве средства усиливающего секрецию универсального трансмиттера воспаления - оксида азота водорастворимых ПС, выделенных из надземной части соссюреи спорной (S. controversa D), соссюреи иволистной (S. salicifolia (L.) DC.) и соссюреи Фролова (S. frolovii Ldb). Новое свойство полученных водорастворимых ПС было обнаружено в результате экспериментальных исследований и для специалиста явным образом не вытекает из уровня техники, а описание этих свойств не обнаружено авторами в патентной и научно-медицинской литературе. Таким образом, предлагаемое техническое решение соответствует критериям изобретения, а именно - «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».

Надземную часть растений заготавливают в местах естественного произрастания в середине вегетационного периода (июнь-июль) и высушивают под навесом на открытом воздухе при температуре 25-35°С, в течение 10 дней до содержания влаги не более 9%. Выделение полисахаридов проводят по следующей методике: траву измельчают, просеивают через сита с диаметром пор 1-3 мм, обезжиривают и депигментируют хлороформом в аппарате Сокслета при температуре кипения, из сырья удаляют остатки хлороформа путем экспозиции в вытяжном шкафу, затем замачивают в этилацетате (1:15), настаивают 24 ч, фильтруют, операцию повторяют дважды и удаляют остатки этилацетата из сырья вышеуказанным способом. Далее сырье замачивают в 95% этаноле (1:20) и настаивают в течение 24 ч, далее фильтруют, операцию повторяют трижды, отжимают под прессом и высушивают до полного удаления этанола. Подготовленный растительный материал заливают водой очищенной 1:50, экстрагируют при температуре 25°С в течение 0,5 ч при перемешивании магнитной мешалкой, затем фильтруют через 4 слоя стерильной марли и бумажный фильтр. Экстракцию повторяют трижды, полученные извлечения объединяют и концентрируют на роторном испарителе при температуре 35°С.

Концентрат капельно прибавляют к 95% этанолу (1:4) при перемешивании на магнитной мешалке, затем отстаивают в течение 12 часов при комнатной температуре, полученный осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера и промывают 95% этанолом до обесцвечивания фильтрата Выделенную сумму полисахаридов растворяют в воде 1:4 соединяют в соотношении 1:5 с раствором хлороформ-изоамилол (5:1), перемешивают на магнитной мешалке, в течение 0,5 ч, центрифугируют, водный слой содержащий полисахариды отбирают, операцию повторяют дважды. Очищенный раствор ПС переносят в полупроницаемую мембрану с диаметром пор 15 кДа, диализируют против воды очищенной в течение 30 ч, полученный диализат фильтруют через бумажный фильтр, лиофилизуют.